色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
色譜柱的維護:
1、色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖相來平衡色譜柱。
2、色譜柱的再生
長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數(shù)減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。建議用來沖洗柱子的溶劑體積。
3、色譜柱的維護
a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有-定的溶解度);
b.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍;
C.避免流動相組成及極性的劇烈變化;
d.流動相使用前必須經(jīng)脫氣和過濾處理;
e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中;
f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。