Shim-Pack色譜柱封端和未封端區(qū)別是什么:C18(封端)是以硅膠為基質(zhì)的反相C18萃取柱,具有高鍵和密度等特點。主要應(yīng)用于血液、血漿、尿液中藥物及其代謝物、蛋白、DNA等大分子樣品的脫鹽、環(huán)境水樣中的有機物的富集等。ODS C18-N (未封端)是以硅膠為基質(zhì)的未封端的反相C18萃取柱,表面較多的硅醇官能團提供了額外的極性相互作用,同時與封端的吸附劑相比,增強了對堿性化合物的保留。是極性和非極性化合物萃取的通用性固定相。 柱填料的物理性能對填料色譜行為有重要影響。填料主要的物理性能包括:顆粒度、孔徑、孔體積、鍵合相化學(xué)、含碳量及烷基化處理。
1、孔徑是指填料顆粒間的孔間隙。一般所說的孔徑是指填料的平均孔徑。球形填料裝柱后平均孔徑分布比較窄,柱床結(jié)構(gòu)均勻,柱效高,重現(xiàn)性好;無定形填料平均孔徑分布較寬,柱床結(jié)構(gòu)不均勻,流動相線性速度不均勻,譜帶擴寬。
平均孔徑的大小對分離大分子化合物有較大的影響,在分離含有較大分子的樣品時可能會有分子排阻效應(yīng),或產(chǎn)生吸附效應(yīng)從而影響定量的回收率及準(zhǔn)確度。因而在用反相色譜分離諸如蛋白或多肽樣品時應(yīng)考慮選用大孔徑的反相柱填料。孔體積作為硅膠多孔性的參數(shù),在分離分析較大分子化合物時可作參考,選用較大孔體積的反相柱填料。
2、顆粒度是指柱填料的顆粒直徑的大小。實際上色譜柱上所標(biāo)的粒徑是一個平均值。如粒徑5μm并不是柱中填料所有的顆粒直徑都是5μm,實際上有一個顆粒分布度。這種分布度對柱反壓及柱效有重要作用。一般來說,平均顆粒度越小,顆粒分布度越小,色譜柱效越高,反壓亦越高。目前C18柱填料粒徑在4~10μm之間。