下面就色譜柱再生的一些問題作說明,希望能給大家?guī)硪恍椭?/div>
1、色譜柱在以下幾種情況必須再生處理
a.使一段時間,柱效明顯下降;
b.柱被污染,特別是在程序升溫時,基線漂移和噪聲超過容忍程度或出現(xiàn)“鬼峰”;
c.柱頭塌陷,柱床短路或斷位(在玻璃柱中容易發(fā)現(xiàn)),而出現(xiàn)尖峰或雙重峰;
d.峰形展寬,保留時間明顯變化;
e.待分離組分和固定相表面非特異性相互作用,引起保留時間較短的峰拖尾或出現(xiàn)雙峰;
2、毛細管柱再生的幾種方法
a.用載氣將色譜柱污染物沖洗出來;
b.將柱頭截去100mm 或更長一些;
c.若使用交聯(lián)的色譜柱,可在儀器上反復注射溶劑進行沖洗。常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷,每次可進樣5~10μL;
d.交聯(lián)柱在儀器上沖洗無效時,可把柱拆下來用二氯甲烷或氯仿沖洗,溶劑用量視柱的污染程度而定,一般20mL 左右。
3、色譜柱再生前應注意的問題
當分析出現(xiàn)問題時,不能只考慮是柱問題,而馬上進行再生。除上述情況外,還應考慮樣品處理、進樣技術(shù)、操作有無失誤、數(shù)據(jù)處理參數(shù)有無改變等可能帶來的問題。
a.襯管、預柱和檢測器被污染也會引起基線不穩(wěn)定、出現(xiàn)“鬼峰”或裂解峰;
b.新的注射墊也會引起基線漂移和出現(xiàn)“鬼峰”;
c.襯管密封欠佳、柱安裝死體積或檢測器固有特性也會引起較早出現(xiàn)峰的拖尾;
d.分析系統(tǒng)發(fā)生變化(如漏氣嚴重)也可能使保留時間突變;
e.峰變寬,除柱效下降外也可能由柱外效應引起;
f.進樣量太大也會引起峰變寬、拖尾或保留時間變短;
g.色譜柱長時間樣品過載,保留時間也會變小等。
4、色譜柱再生時應注意的幾個問題
a.如前所述和色譜柱老化一樣,不是溫度越高越好,時間越長越好;建議不要使用長時間烘烤的方法,來處理受到污染的色譜柱,因為烘烤時,溫度會把污染的殘留物變成不能溶解的物質(zhì),再用溶劑清洗也無濟于事;
b.儀器在高靈敏度操作時,如:量程在1×10-11A/mV以下,痕量分析程序升溫過程中,溫度升到大于180℃后,基線明顯漂移是不可避免的;
c.不同類型柱子,再生方法不同;
d.樣品種類、組分、進樣量不同或操作時間長短不同,再生方法也不同;
e.儀器本身條件如:氣源種類、純度、凈化條件、進樣口結(jié)構(gòu)和操作檢測器不同,再生柱方法也有區(qū)別;
f.高分子量組分污染色譜柱后,高溫再生時間長會導致固定相的老化;使用交聯(lián)或鍵合柱最好用溶劑漂洗再生,漂洗溶劑流動方向一定要從柱出口注入。應該注意,毛細管柱交聯(lián)鍵合率通常不到90%,因此會漂洗掉未化學結(jié)合的液相部分,所以保留時間和分離狀態(tài)會有所變化;
g.對于難揮發(fā)物,碳化物是不能通過再生除去,對于填充柱最好使用帶襯管氣化室進樣器,對于毛細管可通過把柱入口切去30~50cm的方法除去污物段。有條件的可以使用預柱,把不揮發(fā)的有機物、無機物和顆粒材料阻留在預柱中,需要時更換預柱;
h.在某些情況下,色譜柱要在溫度極限附近使用,這時基線漂移和大噪聲已不可避免,柱的再生要求只能視情況而定;
i.不是所有色譜柱通過再生均能恢復原來性能。